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免疫組化試劑盒(抗兔二抗)

免疫組化試劑盒(抗兔二抗)

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產品價格 1800 貨號 RC0080R
規格 100T 備注 10mL二抗


免疫組化試劑盒100T

原理: DAB 染色液是特別敏感的二步法免疫組化試劑盒,適合與兔或鼠源抗配用。其主要過程為,一抗與切片中的靶抗原形成抗原抗體復合物,酶標羊抗/ IgG 聚合物二抗(以多聚葡聚糖分子為骨架,辣根過氧化物酶與羊抗鼠/ IgG 形成的聚合物)與抗原抗體復合物中的抗結合,再利用辣根過氧化物酶催化二氨基聯苯胺(DAB)在抗原部位形成棕色顯色。

產品貨號:RC0080R   

規格:100T

試劑盒組成:標羊抗IgG 聚合物二抗 45mL DAB 顯色劑(100x) A4100ulDAB顯色緩沖液 B 410mL3%過氧化氫10mL

使用方法:DAB顯色緩沖液DAB 顯色劑(100x)=100:1; DAB顯色工作液C=A+B

其他自備試劑:修復液,pbsBSA


操作流程如下:

石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯15min-二甲苯15min-無水乙醇5min-無水乙醇5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。

抗原修復:組織切片置于盛滿EDTA抗原修復緩沖液PH8.0其他抗原修復液可以根據情況選擇的修復盒中于微波爐內進行抗原修復,中火8min至沸,停火8min保溫再轉中低火7min此過程中應防止緩沖液過度蒸發,切勿干片。自然冷卻后將片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min

阻斷內源性過氧化物酶:切片放入3%過氧化氫溶液(30%雙氧水:純水=1:9),室溫避光孵育25 min,將片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min

非特異性封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內滴加3%BSA或者專用封閉液均勻覆蓋組織,室溫封閉30min

加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加按一定比例配好的一抗工作液(可選擇PBS或者抗稀釋液配制一抗工作液切片平放于濕盒內4°C孵育過夜。(濕盒內加少量水防止抗體蒸發)

加二抗:片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與一抗相應種屬的標羊抗/IgG 聚合物二抗覆蓋組織,室溫孵育50min

DAB顯色:片置于PBSPH7.4中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加新鮮配制的DAB顯色工作液C,顯微鏡下控制顯色時間,陽性為棕黃色,自來水沖洗切片終止顯色。

石蠟切片免疫組結果判讀

蘇木素染細胞核為藍色,DAB顯出的陽性表達為棕黃色



試劑盒:    13026142229
檢測服務: 18221045909

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