多色免疫熒光為什么也叫做多重免疫組化？

Multiplex IHC，簡稱mIHC，直譯多重免疫組化，也叫多重?zé)晒饨M化、多色免疫熒光、熒光多色標(biāo)記等，到底是組化還是熒光？初次接觸的人有些懵，下面就要從它的原理給大家解釋下，為什么呈現(xiàn)的是熒光圖像而同時我們又稱之為組化又沒錯,要想充分明白這個問題，我們從以下幾個方面來解釋：

1-mIHC的基本原理

mIHC實(shí)驗(yàn)是基于使用酪胺-熒光基團(tuán)檢測開發(fā)的。其實(shí)驗(yàn)步驟使用序列標(biāo)記策略，每輪標(biāo)記包含一抗孵育和二抗孵育。隨后是酪胺-熒光基團(tuán)偶聯(lián)物沉淀。接下來將抗體hrp剝離，或在微波爐或者高溫中加熱，去除樣本中的抗體，所有沉淀的熒光基團(tuán)，仍與樣本共價(jià)結(jié)合。mIHC的基本原理：內(nèi)源性過氧化物酶封閉--抗原修復(fù)--一抗孵育--hrp二抗--顯色（熒光顯色沉淀），由此可見，這基本就是免疫組化的經(jīng)典原理；只不過mIHC重復(fù)了組化的兩次（雙標(biāo)） 三次（三標(biāo)）甚至六次（六標(biāo)七色），最后一步再做個負(fù)染dapi（類似于組化的蘇木素負(fù)染）！

2-為什么使用多重而非單染色I(xiàn)HC？

如果您的研究方向是探索不同細(xì)胞類型之間的交互作用，或者需要評價(jià)多個生物標(biāo)志物和組織的表達(dá)或共定位，可以使用mIHC實(shí)驗(yàn)。

3-mIHC實(shí)驗(yàn)的抗體使用

使用經(jīng)過高度驗(yàn)證的抗體，確保得到可靠的結(jié)果。通常而言經(jīng)過IHC-P驗(yàn)證的抗體，同樣也能在mIHC中使用，但需要再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)步驟優(yōu)化。

   通過以上的解釋和分享，大家都了解了為什么多色免疫熒光也叫多重免疫組化或者mIHC了嗎？如果大家還是有疑問，可以隨時聯(lián)系我們?nèi)銊?chuàng)生物，我們給您做個性化一對一的講解！

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