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技術專欄

多聚甲醛和甲醛固定液以及中性福爾馬林固定液如何來選擇?

發表時間:2022-05-14 11:26

實驗當中,很多實驗需要用到固定液,比如流式 細胞爬片ICC IF   組織切片冰凍熒光染色 以及石蠟    切片 IHC IF 以及病理HE染色等,下面就多聚甲醛 福爾馬林 甲醛 這 三個代表性的名字以及衍生出來的固定液,來做一個簡單的經驗分享:

甲醛是一種無色,強烈氣味的刺激性氣體,比空氣重,可溶于水,其35%--40%的水溶液被稱為福爾馬林,再加入10%-15的甲醇防止多聚化,否則甲醛會多聚形成多聚甲醛PFA。多聚甲醛式N=80100的低分子量聚合物。其產物為白色固體(粉末或者顆粒狀),不溶于乙醇 乙醚 和丙酮,溶于氫氧化鈉 等堿性溶液以及 低濃度酸液當中。在加熱情況下,會慢慢釋放甲醛。平常 為了固定,需要用PBS將甲醛溶液稀釋到0.5%-4%。10%中性福爾馬林,實際就是4%有效成分的甲醛(含40%甲醛的福爾馬林稀釋10倍,然后 調PH值到偏弱堿性)。甲醛放置過久會慢慢酸化 形成甲酸 ,所以用偏堿性的 固定液,會有效防止這個情況發生(在保質期內)。基于以上的內容,這里糾正一下一個常識性的錯誤:大家都認市面上買的4%多聚甲醛固定液是 多聚甲醛起著 固定作用,實際上,多聚甲醛式一種不能溶解的白色固體物質,沒法直接用來固定任何樣本,我們平時所謂的多聚甲醛溶液,其本質都是通過加熱方法獲得的不含甲醇的甲醛溶液,其有效成為為甲醛!


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